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对于样本的完美质控,我们是认真的
样本质控的重要性 为什么要对样本进行质控? 分子生物学实验流程一般是对样本(组织/细胞)进行预处理后提取DNA、RNA、蛋白质等生物大分子用于下游的深度分析,比如qPCR、测序、微阵列芯片、蛋白质谱等。对生物大分子的浓度、纯度、完整性、污染物残留等进行质控对下游检测数据的准确性、客观性和重复性至关重要。比如:qPCR时,DNA模板浓度过高或过低都会影响PCR扩增效率,导致得出不够准确的定量结果;模板中残留较多的苯酚会影响PCR酶的活性甚至使酶失去活性;进行转染实验时,质粒的浓度与质量未经质控会影响细胞转染效率等。因此,对生物大分子的有效质控势在必行。 对于样本质控,你怎样做? Acclaro源于意大利语,寓意为"to make clear",Acclaro样品智能检测技术蕴含三层涵义: 1.污染物鉴定:使用强大的数据分析算法鉴定样品中的污染物。 2.机载技术支持:提供具有信息提示和指导性故障排除的技术支持。 3.上样液柱完整性监测:嵌入式传感器和数字图像分析,监测液柱完整性,识别液柱中是否含有气泡。 样本检测 进入 分析时代!!! 一次检测,全面分析 Acclaro样品智能检测技术使用精细的数学算法来分析光谱数据,自动鉴定出样品中的污染物类型。 当检测到纯度不符合要求的样本时,软件会自动报警提示,提供可能的污染物信息,并对样本浓度进行矫正,在检测界面上可以同时查看多个样本的信息。如下图所示,Acclaro用黄色三角标识符合标记了第四号dsDNA样本可能存在污染物,提醒样本存在污染。 点击黄色三角标识,可以看到样品中存在蛋白时,导致A260值增大(蓝色光谱),从而dsDNA浓度比实际的高,污染物分析技术可将蛋白的含量(橙色光谱)从原始数据中扣除,从而得到矫正后正确的DNA浓度(绿色光谱)。 酚氯仿法是提取核酸的常用方法,苯酚的残留会使蛋白质变性,可能会导致下游实验的失败。 在225ng/μL的dsDNA标准品中分别掺入不同量的苯酚,制成9个样品:传统方法(蓝色)和NanoDrop One(绿色)测试结果: NanoDrop One: · 当苯酚含量低至38ppm时, NanoDrop One鉴定出了苯酚的污染, 并且对核酸浓度进行了矫正。 传统方法: · 当苯酚浓度达到1200ppm时,A260/A280才处于不可接受范围内。 传统方法给出的浓度值(蓝色)几乎是真实核酸浓度(绿色)的4倍! 因此,相较于传统的检测方法,NanoDrop One Acclaro样品智能检测技术能更加灵敏地鉴定出样品中残留的污染物,给出真实的样品浓度。 实时的故障排除指南和技术支持。 点击警报解决按钮查找Acclaro支持工具。 基于NanoDrop技术支持最常收到的问题: 1.介绍个别问题的常见原因,推荐解决方案 2.通过support tools提供故障排除指南 3.提供样品质量信息和排除故障指南 4.软件内含短视频动画培训 了解样品纯度比值超出可接受范围的原因及推荐的解决方案。 通过内置的传感器对样品形成的液柱进行数码成像,通过图像分析液柱是否有异常。 液柱损坏: 取消检测 样品中有气泡: 液柱中的气泡会散射光,并提高340 nm基线校正值;光散射会影响吸光度测量 ,影响光谱图的质量,以及浓度计算的准确性,建议重新上样检测。 基因有限公司为NanoDrop系列产品中国区独家代理商。公司的宗旨是“基因燃亮生命·生物技术连接世界”,专业的团队为各大科研机构提供安装培训,技术支持,应用培训与售后维护一条龙服务,赢得客户的一致好评与信任。如果您想试用我们的仪器,请扫描下方二维码联系我们吧。
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